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              建立 BALB/c-Nude 裸小鼠為背景的人源化 ACE2(hACE2)轉基因裸小鼠動物模型

              • 分類:學術講座
              • 作者:【如需咨詢購買細胞或技術服務,請點擊24小時客服咨詢或留言哦】
              • 來源:專業提供(ATCC,DSMZ,RCB,JCRB細胞庫源細胞、動物實驗、CRO服務、SCI潤色)
              • 發布時間:2022-09-19 10:56
              • 訪問量:

              【概要描述】利用 hACE2 轉基因小鼠與雄性BALB/c-Nude裸小鼠雜交獲得F1代,將F1代hACE2小鼠與BALB/c-Nude裸小鼠回交獲得F2 代,再將F2代hACE2小鼠互交獲得F3代hACE2轉基因裸小鼠。對F3代中hACE2轉基因裸小鼠的生長發育、生理指標及免疫指標與C57BL/6J野生型小鼠、hACE2小鼠和BALB/c-Nude裸小鼠進行對比分析

              建立 BALB/c-Nude 裸小鼠為背景的人源化 ACE2(hACE2)轉基因裸小鼠動物模型

              【概要描述】利用 hACE2 轉基因小鼠與雄性BALB/c-Nude裸小鼠雜交獲得F1代,將F1代hACE2小鼠與BALB/c-Nude裸小鼠回交獲得F2 代,再將F2代hACE2小鼠互交獲得F3代hACE2轉基因裸小鼠。對F3代中hACE2轉基因裸小鼠的生長發育、生理指標及免疫指標與C57BL/6J野生型小鼠、hACE2小鼠和BALB/c-Nude裸小鼠進行對比分析

              • 分類:學術講座
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              • 來源:專業提供(ATCC,DSMZ,RCB,JCRB細胞庫源細胞、動物實驗、CRO服務、SCI潤色)
              • 發布時間:2022-09-19 10:56
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              詳情

                摘要
                宿主血管緊張素轉換酶2(angiotensin-converting enzyme 2,ACE2)是一種鋅金屬蛋白酶,在肺臟、腸胃及大腦等組織中廣泛表達11。ACE2是SARS-COV2及SARS-COV的受體,在研究SARS發病機制和抗病毒藥物的評價具有重要作用,也是本次新型冠狀病毒的藥物治療及疫苗研發靶點P-51。
                早在2003年,研究者建立了人源化ACE2(hACE2)轉基因小鼠動物模型。由于裸小鼠具有T細胞缺乏的免疫缺陷等特點,本研究試圖建立一種攜帶 hACE2 基因的免疫缺陷嚙齒類動物模型,為研發抗SARS-Cov2病毒藥物和疫苗提供具有免疫缺陷的動物模型。
                關鍵詞
                小鼠動物模型,小鼠模型,模型小鼠,動物模型,裸小鼠,轉基因免疫缺陷裸小鼠
                目的
                建立 BALB/c-Nude 裸小鼠為背景的人源化 ACE2(hACE2)轉基因裸小鼠動物模型。
                方法


                利用 hACE2 轉基因小鼠與雄性BALB/c-Nude裸小鼠雜交獲得F1代,將F1代hACE2小鼠與BALB/c-Nude裸小鼠回交獲得F2 代,再將F2代hACE2小鼠互交獲得F3代hACE2轉基因裸小鼠。對F3代中hACE2轉基因裸小鼠的生長發育、生理指標及免疫指標與C57BL/6J野生型小鼠、hACE2小鼠和BALB/c-Nude裸小鼠進行對比分析。
                結果
               ?。?)hACE2轉基因裸小鼠生長發育指標與C57BL/6J野生型小鼠、hACE2小鼠和BALB/c-Nude裸小鼠無明顯差異。
               ?。?)hACE2轉基因裸小鼠生理指標中,建立的hACE2轉基因裸小鼠與BALB/c-Nude裸小鼠相似,病理解剖觀察發現,小鼠體內均無胸腺。臟器系數結果與BALB/C-Nude裸小鼠比較,脾臟系數和肝臟系數出現顯著差異(P<0.05)。血常規檢測指標與C57BL/6J野生型小鼠、hACE2小鼠比較,中性粒細胞百分比(NEU)、淋巴細胞百分比(LYM)和單核細胞百分比(MONO)均出現顯著差異(P<0.01)。
               ?。?)hACE2轉基因裸小鼠免疫指標中,與C57BL/6J野生型小鼠和hACE2小鼠比較,CD45+CD3+、CD45+CD3+CD4+、CD45+CD11B+和CD45+NK+均出現顯著差異(P<0.01),與BALB/c-Nude 裸小鼠無明顯差異。
                結論
                成功建立了BALB/c-Nude 為背景的 hACE2 轉基因免疫缺陷裸小鼠動物模型。
                討論
                本研究成功建立了BALB/c-Nude為背景的hACE2轉基因免疫缺陷裸小鼠動物模型。
                hACE2轉基因裸小鼠(Nude-hACE2)表現為無毛裸小鼠,生長發育情況與BALB/c-Nude裸小鼠相近。通過病理解剖觀察,hACE2轉基因裸小鼠與BALB/c-Nude 裸小鼠相同,均缺少胸腺組織。胸腺作為機體重要的淋巴組織,來自骨髓的淋巴干細胞在胸腺中分化為T細胞,成熟的T細胞再分化為輔助T細胞和細胞毒性T細胞,隨后輸出胸腺,進入外周淋巴器官。hACE2轉基因裸小鼠胸腺的缺少導致其無法正常分化 T 細胞,進而造成機體細胞免疫缺陷。血常規指標檢測結果顯示,hACE2 轉基因裸小鼠血液血細胞分布情況與BALB/C-Nude裸小鼠相近,與C57BL/6J野生型小鼠、hACE2 小鼠比較,LYM偏低主要與hACE2轉基因裸小鼠先天性免疫缺陷有關;NEU、MONO偏高則可能是由于在環境中飼養中因免疫缺陷造成的某些細菌感染有關。
                免疫指標檢測結果顯示,hACE2轉基因裸小鼠的CD45+CD3+、CD45+CD3+CD4+以及CD45+CD3+CD8+低于C57BL/6J野生型小鼠,hACE2轉基因裸小鼠的CD45+CD3+、CD45+CD3+CD4+以及CD45+CD3+CD8+均與BALB/C-Nude裸小鼠相近,反映hACE2轉基因裸小鼠體內T細胞無法正常表達且在免疫水平上與BALB/c-Nude裸小鼠具有很高的相似性,無胸腺導致缺乏成熟的T細胞,進而導致細胞免疫功能的缺失。
                衰老對免疫系統有著深遠的影響,免疫系統的固有和適應性免疫應答都隨著年齡增長而呈現功能下降****。在老齡化過程中,由于胸腺的萎縮導致小鼠體內T細胞數量明顯減少,其分化增殖能力下降,誘生新的T細胞記憶反應能力也受損,導致T細胞庫的多樣性減少19-101。根據不同月齡的免疫指標結果,裸小鼠因具有胸腺退化的缺陷,自身的細胞免疫功能缺失,故 hACE2 轉基因裸小鼠與BALB/c-Nude 裸小鼠相似,免疫能力自始至終都處于較弱的水平且免疫能力不隨年齡增長而發生改變。同時,hACE2轉基因裸小鼠由于其自身的免疫能力低下,在日常飼養的過程中,隨著年齡增加還需對其提供清潔的生活環境、富含營養的飼料等,防止因環境問題或飼養不當而導致動物產生細菌感染或死亡。
                hACE2轉基因小鼠作為嚙齒類COVID-19動物模型,可應用于SARS-COV2發病機理、疫苗及治療效果等方面的研究,其主要的優勢表現在遺傳背景清晰,繁殖周期短,飼養條件可控以及倫理問題較少。通過與裸小鼠繁育出的hACE2轉基因裸小鼠不僅具有以上優點,還具有裸小鼠先天性細胞免疫缺陷等特點,作為攜帶hACE2基因的免疫缺陷動物模型,或許可以為SARS-CoV2疫苗研究過程中安全性和免疫原性評價等方面提供一些支持。

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